Човешко здраве


Девет десети от нашето щастие се основава на здравето

  • У дома
  • карта на сайта

Анализ на фагоцитозата

Фагоцитоза

Фагоцитозата е процес на усвояване от фагоцитите на микробни клетки, вируси и собствени клетки на тялото.
Изследването на фагоцитозата разкрива нарушение на клетъчната връзка на имунитета. В този случай се извършва проучване и анализ на абсорбиращата и смилателната способност на неутрофилите.

Крайни срокове7 дни
Синоними (rus)FAN, фагоцитна активност на левкоцитите
Синоними (eng)Фагоцитна активност на неутрофилите
Подготовка за изследванеИзбягвайте приема на храна за 8-12, преди да дарите кръв. Можете да пиете вода без добавена захар.
В навечерието на теста изключете спорта и другата физическа активност.
Не пийте алкохол и не пушете в навечерието на вземане на проби.
Видът на биоматериала и методите за приемането муВенозна кръв от кубиталната вена.

За какво е фагоцитозата??

Неутрофилите са клетки на имунната система, отговорни за клетъчния компонент на имунния отговор. Неутрофилите имат способността да фагоцитозират - улавянето на чужди клетки и частици и по-късно тяхното храносмилане, последвано от смъртта на самия фагоцит. Нарушенията на тези процеси водят до липса на клетъчен имунитет. По този начин определянето на активността на фагоцитните неутрофили се използва предимно за диагностика на първични и вторични състояния на имунодефицит. Също така, този анализ може да бъде предписан при наличие на инфекциозни и възпалителни процеси в организма, за диагностика на алергични и автоимунни заболявания. Наред с други неща, индикация за анализ на фагоцитозата може да бъде необходимостта от контрол на състоянието на човешката имунна система след имуносупресивна терапия..

Какви показатели се определят?

За оценка на фагоцитозата се изследват два основни показателя: фагоцитен брой (FP) и фагоцитен индекс (PI). Първият показател определя способността на неутрофилите да абсорбират чужди частици (чрез преброяване на броя на чуждите обекти, абсорбирани от фагоцитите). Скоростта на този показател е 5-10 чужди частици. Вторият показател характеризира процеса на храносмилане на микробни клетки от неутрофили. Нормалната стойност на фагоцитния индекс трябва да надвишава 1,0. Други показатели за фагоцитоза също могат да бъдат изследвани, като например: броя на активните фагоцити, фагоцитния индекс и фагоцитния кръвен капацитет. Фагоцитният индекс характеризира процента на неутрофилите, участващи в процеса на фагоцитоза. Тази стойност трябва да бъде на ниво 65-95%. Стойността на фагоцитния кръвен капацитет характеризира броя на микробните тела, абсорбирани от фагоцитите от 1 литър кръв.

Промени в анализа на фагоцитозата

Активността на неутрофилите се увеличава в острия период на различни инфекциозни и възпалителни заболявания, както и при алергични и автоимунни заболявания. Намаляване на показателите за фагоцитна активност настъпва, когато:

  • хронифициране на инфекциозния процес в организма
  • заболявания, свързани с циркулацията на имунните комплекси
  • различни имунодефицитни състояния и заболявания
  • имуносупресивна терапия
  • тежки наранявания, изгаряния
  • злокачествени новообразувания
  • заболявания на съединителната тъкан
  • общото тежко състояние на организма, кахексия
  • тежко увреждане на бъбреците, придружено от масивна загуба на протеин
  • йонизиращо лъчение

Изследването на фагоцитната активност на неутрофилите е важен компонент на цялостното изследване на човешкото здраве, не само със съмнение за увреждане на клетъчната връзка на имунитета, но и с редица други заболявания, които по някакъв начин засягат състоянието на имунната система на организма.

Нарушения на фагоцитозата

Фагоцитозата на микроби и други чужди частици е явление, чиято същност е доста проста за разбиране. В този процес специални клетки, наречени фагоцити, откриват, атакуват, абсорбират и смилат всички потенциално вредни предмети, които са влезли в тялото. За да сме здрави, имунната ни система трябва да работи „с плюс“, а фагоцитозата трябва да протича по такъв начин, че всяка инфекция, токсин или друг вреден предмет да бъде направена своевременно безвредна. За съжаление, понякога има нарушение на фагоцитозата. Какво е това, какви възможности са възможни и как това заплашва?

Патологично усилване на фагоцитозата:

В някои случаи фагоцитозата е повишена. Това се дължи на факта, че фагоцитните клетки по различни причини се активират твърде много и започват да атакуват насилствено реални или въображаеми „врагове“. Понякога собствените тъкани на тялото също попадат под разпределението, което фагоцитите приемат за агресори и започват интензивно да абсорбират.

Фагоцитозата, скоростта на която се определя от специални анализи, може да се засили чрез действието на така наречените опсонини. Това са вещества, които увеличават разпознаването на „вражески“ антигени от фагоцитите и ги правят мишени за фагоцитоза. Опсонините са съединения като С-реактивен протеин. Засиленото производство на това вещество в организма се проявява при редица ревматични заболявания: ревматоиден артрит, склеродермия, системен лупус еритематозус и др..

Изброените заболявания се характеризират с рязка промяна в хода на имунните процеси. Фагоцитозата се увеличава и това води до факта, че нормалните клетки на ставите, бъбреците, сърцето са подложени на тотален геноцид от страна на имунната система. Тялото поглъща себе си...

Ревматоиден артрит - резултат от повишена фагоцитоза

Патологично отслабване на фагоцитозата:

Често лекарите трябва да се справят с факта, че скоростта на фагоцитоза в човешкото тяло се променя по обратния начин. С други думи, микробната фагоцитоза е отслабена. Неговото отслабване е по-често от неговото укрепване и намаляването на активността на фагоцитните клетки може да настъпи на всеки от многобройните етапи на процеса..

Ако разпознаването на чужди компоненти е нарушено, фагоцитите спокойно съжителстват с вредни частици, като не проявяват ни най-малък интерес към тях и им позволяват да създават каквото и да било в тялото. Ако миграцията (движението) на фагоцитите до мястото на проникване на агресора е нарушена, тогава тези клетки не могат да проникнат във фокуса на събитията и да унищожат патогена. Дори има собствено име: "синдром на мързеливи бели кръвни клетки".

Когато активността на лизозомните ензими е намалена в организма, фагоцитозата също е нарушена в него. Развива се непълна фагоцитоза, по време на която патогенът прониква във фагоцитите, може да живее там без никаква вреда за себе си. Ако не говорим за микроби, а за други частици, тогава непълната фагоцитоза може да допринесе за развитието на заболявания на съхранението: заболявания, при които определени компоненти се натрупват в клетките, които нарушават тяхната активност (желязо при хемохроматоза, мед при болест на Уилсън и др.).

Затихването на фагоцитозата е причина за 15% от всички случаи на първичен имунодефицит.

Как можете да подозирате нарушение на фагоцитозата:

За повишена фагоцитоза, например, при същите ревматични заболявания, ще бъде възможно да се познае почти веднага, по характерните симптоми и признаци на възпаление при кръвни тестове. Що се отнася до отслабването му, признаците на намалена фагоцитоза, чието лечение, между другото, трябва да се извърши възможно най-скоро, могат да останат незабелязани за дълго време.

Типичните признаци на отслабена фагоцитна активност изглеждат така:

• Склонност към чести ARVI заболявания

• Склонност към хронични възпалителни процеси

• Повтарящи се инфекции, включително гъбични

• Инфекциозни заболявания, причинени от опортюнистична флора

• Хепатоспленомегалия (уголемяване на черния дроб и далака)

• Гнойни кожни заболявания

Ако имате поне 1-2 точки от този списък, препоръчително е да помислите колко пълно протичат вашите имунни процеси.

Когато човек има нарушена фагоцитоза, лечението на това разстройство се извършва по най-различни начини, в зависимост от това как и по какъв механизъм се е случило. В някои случаи се изискват прости мерки, като прием на витамини, в други е необходима сериозна генна терапия..

Въпреки това, за всички случаи има универсално лекарство, което може да помогне. Transfer Factor е имуномодулатор от последно поколение, който всъщност съчетава всички възможни методи за въздействие върху имунната система. Може да се използва както за усилване, така и за отслабване на фагоцитозата, както и за предотвратяване на нейните нарушения, тъй като учи имунната система да работи правилно и има нормализиращ ефект върху нейната функция. Използването на Трансфер Фактор, заедно с лечението, предписано от лекаря, завършва с успешното преодоляване на почти всеки здравословен проблем и елиминирането на какъвто и да е тип фагоцитозно разстройство.

Фагоцитна недостатъчност Причини за патология на фагоцитозата.

Намаляване на броя на фагоцитите.

Структурни и функционални промени във фагоцитите.

Промени в хуморално-хормоналната регулация на процесите на фагоцитоза и други.

Фагоцитната недостатъчност (FN) е свързана с нарушения в A-подсистемата на ICS.

Видове фагоцитна недостатъчност:

По произход FN се разделя на:

(а) първичен, т.е. наследствени, вродени;

(б) вторични - придобити в процеса на онтогенеза.

Повечето първични форми на FN се развиват по автозомно-рецесивен начин, по-рядко - свързани със половата хромозома (X хромозома).

Вторичният (придобит) FN е най-често резултат от:

инфекциозни токсични заболявания и състояния;

дисфункции на черния дроб и бъбреците;

системни заболявания на съединителната тъкан (лупус еритематозус, ревматоиден артрит);

2. Според механизма на развитие FN се подразделя на следните форми:

Левкопеничните форми на FN се развиват в резултат на потискане на пролиферацията и / или узряването на левкоцитите. Това се случва под въздействието на йонизиращо лъчение, токсини, цитостатици. Възможно е да има наследствена блокада на разделяне и диференциация.

Блокадата на пролиферация на миелоидните стволови клетки, както и узряването на миелобластите и монобластите е придружено от развитието на моноцитопения, неутропения и / или фагоцитна недостатъчност - синдром на Chédiak-Higashi. Пациентите с тази форма на FN се характеризират с нарушено изпълнение на фагоцитоза, проявяващо се с честото развитие на хронични бактериални инфекции..

Дисфункционалните форми на FN се характеризират с частични или комбинирани нарушения на процесите на фагоцитоза, а именно:

адхезивни свойства на левкоцитите;

абсорбция на обекта на фагоцитоза;

преработвателно съоръжение (ендоцитолиза).

Дисфункционалните форми на FN се основават на наследствени или придобити дефекти:

а) мембрани - мембранопатии (например актинов протеин, плазмолема, лизозомни мембрани);

б) ензими - ензимопатия (например, глюкозен монофосфатен шънт, гликолиза, прооксидантна система на хидролази, лизозоми, най-често миелопероксидаза);

в) съотношението на протеиновите фракции в кръвната плазма - диглобулинемия (по-често с излишък на Ig E, липса на Ig G), които се съчетават с нарушения в процесите на опсонизация и адхезивни свойства на фагоцитите;

г) известно е, че някои микроорганизми, например причинители на анаеробна газова гангрена, произвеждат левкотоксини и антифагини, които причиняват развитието на отрицателен хемотаксис и нарушаване на различни етапи на фагоцитоза (например лизозим, лактоферин, катионни протеини);

д) липса на кислород-независими фактори на лизис на обекта на фагоцитоза (например лизозим, лактоферин, катионни протеини);

е) изместванията в колоидно-осмотичното и онкотичното налягане в околната среда причиняват структурни и функционални промени във фагоцитите и намаляват интензивността на фагоцитния процес;

ж) декомпенсирани промени в киселинно-алкалното състояние - ацидозата или алкалозата водят до отслабване на фагоцитната активност.

Дисрегулиращите форми на FN се придобиват най-често. Те се развиват поради нарушаването на различни етапи на фагоцитоза от биологично активни вещества:

невротрансмитери (катехоламини, ацетилхолин). Техният дефицит и излишък намалява ефективността на фагоцитозата.

хормони (например глюкокортикоиди). Излишъкът от глюкокортикоиди нарушава процесите на разделяне и съзряване на моноцити и гранулоцити, увеличава твърдостта на мембраните и следователно намалява подвижността и адхезивните свойства на тези клетки.

левкокини - физиологично активни вещества на лимфоцити и гранулоцити;

високоактивни агенти от различен произход (простагландини, кинини, биогенни амини, пептиди и други). Значителните отклонения на тяхната концентрация от нормата променят естеството и интензивността на метаболизма на макрофагите и левкоцитите.

Значението на недостатъчността на фагоцитозата. Патологията на фагоцитозата може да причини смущения не само в неспецифичните клетъчни защитни механизми, но и да предизвика дълбоки патологични промени във функционирането на имунната система на организма. Този факт се дължи на факта, че фагоцитите, главно макрофаги, участват в подготовката на антигени и тяхната преработка в имуногенна форма. Освен това те участват в сътрудничеството на Т и В лимфоцитите, което е необходимо за иницииране на имунен отговор. По този начин фагоцитите участват в специфични механизми на реакция на чужди вещества, следователно, с нарушения на процеса на фагоцитоза, като правило се случват нарушения както на специфичната реактивност, така и на специфичните механизми на защита на организма срещу инфекциозни и неинфекциозни патогенни фактори..

При FN настъпва значително повишаване на чувствителността на организма към увреждащото действие не само на силно патогенна, но и на сапрофитна микрофлора. Това се проявява от различни заболявания с инфекциозен характер (тонзилит, стоматит, отит на средното ухо, пиодермия, пневмония, абсцеси и други), които имат продължителен, повтарящ се ход и са слабо податливи на антибиотична терапия..

Намаляването на броя на неутрофилите под 25% от нормалния им брой е животозастрашаващо. Въпреки това, в рамките на FN, има и други също толкова сериозни нарушения, причинени от тежки генетични дефекти в системата за фагоцитоза. Те включват хронична грануломатозна болест и недостатъчност на левкоцитната адхезия..

Липса на адхезивна способност на левкоцитите. Добре известно е, че фагоцитната мембрана съдържа структури, съдържащи гликопротеини, които се наричат ​​интегрини. С тяхна помощ фагоцитът взаимодейства с опсонизирани микроорганизми и последващото им фиксиране върху повърхността на левкоцита. Такива структури, съдържащи интегрини, станаха известни като рецептори за третия компонент на комплемента (CR3).

Всеки CR3 се състои от и и полипептидни вериги с молекулно тегло съответно 165 и 95 kD (CD11 и CD18). Дефицит в адхезивните свойства на фагоцитите възниква, когато има генетичен дефект във веригата на интегрин, който е кодиран от гена на хромозома 21, или във веригата на два други интегрина, наречени антигени, свързани с лимфоцитната функция (AL-1). AL-1 изглежда е изключително важен протеин за клетъчна адхезия и взаимодействия с междуклетъчни адхезионни молекули-1 (ICAM-1) върху мембранната повърхност на ендотелните и други клетки.

В резултат на дефект в AL-1 (β-верига на интегрин) или β-верига на интегрин, фагоцитите на пациенти с адхезивен дефицит на левкоцити губят способността си да се придържат към съдовия ендотел и да мигрират отвъд него във фокуса на възпалението. Това води до нарушаване на образуването на ефективен гноен ексудат и бързо разпространение на инфекциозни принципи, особено в устната кухина и лигавицата на стомашно-чревния тракт..

Хронична грануломатозна болест (CGD). CGD е наследствено заболяване, характеризиращо се с нарушена бактерицидна функция на фагоцитите и проявяващо се с дефект в NADPH оксидазата, който катализира редукцията на молекулярния кислород до атомен кислород (O-). По този начин с CGD фагоцитите губят способността да образуват супероксиден анион (кислород) и водороден пероксиден катион, които са необходими за унищожаването на фагоцитирани бактерии и гъбички, особено тези микроорганизми, които произвеждат ензима каталаза. В резултат на това микроорганизмите във фагоцита остават жизнеспособни за дълго време, стимулирайки имунния отговор на Т-клетките на персистиране на вътреклетъчни бактериални антигени и образуването на грануломи. Пациентите с CGD страдат от пневмония, лимфаденит, абсцеси на кожата, черния дроб и други вътрешни органи.

При ензимните окислително-редукционни реакции с образуването на супероксиден анион и водороден пероксиден катион, цитохромът на фагоцитната мембрана B558, състоящ се от две протеинови вериги, кодирани от 16-ия и X-хромозомния гени, е от най-голямо значение. Най-често срещаната форма е CGD, произтичаща от дефект в X хромозомата, по-рядко - няколко вида CGD, която се развива поради непълноценността на гените на 6-та хромозома, кодираща синтеза на протеинови вериги, обозначени като p 47 или p 67 фагоцитни оксидази.

Оценка на фагоцитната активност

Лабораторна оценка на вродените нарушения на имунитета

Функционална оценка на В-лимфоцитите

Определянето на концентрацията на имуноглобулини в кръвен серум и други биологични течности е един от най-важните интегрални показатели за функционалната полезност на В-лимфоцитите и цялата система за регулиране на хуморалния адаптивен имунитет.

Традиционно концентрацията на серумните имуноглобулини се определя по метода на радиална имунодифузия в гел по Mancini.В момента този метод все още се използва, предпочитание се дава на моноклонални антитела срещу отделни антигенни детерминанти (епитопи), характерни за определени класове имуноглобулини.

Принципът на метода на Манчини е, че пробите от изследваните серуми се поставят в ямки с агар, които съдържат антитела срещу IgM, IgG, IgA в стандартна концентрация. Съдържащите се в тествания серум имуноглобулини се дифузират в агара и при взаимодействие със съответните антитела образуват утаечни пръстени. Докато има излишък на антиген в кладенчето, има постепенно увеличаване на диаметъра на утаяващия пръстен. Крайният размер на утаяващия пръстен зависи от концентрацията на съответните имуноглобулини. Методът на Mancini ви позволява да определите концентрацията на имуноглобулини, равна на 10 μg / ml. Грешката на метода е 10%.

За диагностициране на вродени нарушения на имунитета обикновено се определя фагоцитната и метаболитна активност на неутрофилите и се оценява състоянието на комплементната система.

Най-информативните за оценка на фагоцитната система трябва да се считат за фагоцитен индекс, фагоцитен брой (отразява абсорбционната способност на неутрофилите) и бактерициден индекс (отразява храносмилателния капацитет на неутрофилите).

Фагоцитен индекс (PI) - процентът на клетките, влезли във фагоцитоза, от общия им брой.

Фагоцитно число (PN) - средният брой бактерии или латексни частици, абсорбирани за неутрофил.

Провеждат се и спонтанни и стимулирани тестове за фагоцитоза, като се използват частици латекс. Фагоцитозата с латекс се основава на абсорбцията на латексни частици от неутрофили (адхезия, улавяне и пълно усвояване).

При извършване на спонтанен тест, левкоцитите, изолирани от периферната кръв, се смесват със суспензия от латексови частици; при провеждане на теста за индуцирана фагоцитоза, към получената смес се добавя пирогенален разтвор. След инкубация при 370 ° С в продължение на 30 минути се приготвят цитонамазки и след това във фиксираните и оцветени мазки на Романовски-Гиемза се изчислява процентът на неутрофилите, които са абсорбирали латекс.

Тест за възстановяване на нитроблуев тетразолий - NST-тестът позволява да се оцени метаболитната активност на кръвните гранулоцити, разкрива резервните възможности на вътреклетъчните системи на фагоцитите. Тестът NBT се основава на възстановяването на разтворим багрил, абсорбиран от кръвни левкоцити - нитроблуев тетразолий в неразтворим черен диформазан (вътреядрени включвания - диформазанови бучки) под въздействието на супероксидаза, образувана в реакцията NADPH-оксидаза, която инициира процеса на стимулираща фагоцитоза.

Изложение на реакцията. 0,02 ml 0,9% разтвор на натриев хлорид, 0,02 ml неутрофилна суспензия и 0,02 ml 0,75% разтвор на NBT (нитро син тетразолий) се нанасят върху обезмаслено стъкло.

Като товар се използва търговски липополизахарид на грам-отрицателни бактерии Е. coli или пирогенален разтвор (S. typhi липополизахарид) в разреждане 1:10. Върху друго обезмаслено стъкло се нанасят 0,02 ml LPS, 0,02 ml неутрофилна суспензия и 0,02 ml 0,75% разтвор на NBT. Поставя се във влажна камера за 30 минути. Тампоните се приготвят, изсушават и фиксират. Оцветени с 0,1% неутрален червен разтвор. Неутрофилите се вземат предвид, като се изчислява процентът на левкоцитите с гранули с намален NBT (черен диформазан).

Фагоцитоза и определяне на фагоцитна активност

Фагоцитозата е процес, при който специално проектирани клетки на кръвта и телесните тъкани (фагоцити) улавят и смилат твърди частици. Откритието на фагоцитозата принадлежи на И. И. Мечников. Извършва се от два вида клетки: гранулирани левкоцити (гранулоцити), циркулиращи в кръвта и тъканните макрофаги. При животните ооцитите, плацентарните клетки, клетките, покриващи телесната кухина, и пигментният епител на ретината също могат да фагоцитозират..

Механизмът на фагоцитозата е от същия тип и включва 8 последователни фази: 1) хемотаксис (насочено движение на фагоцита към обекта);

2) адхезия (закрепване към обекта);

3) активиране на мембраната (актин-миозиновата система на фагоцита);

4) началото на самата фагоцитоза, свързано с образуването на псевдоподии около абсорбираната частица;

5) образуването на фагозома (абсорбираната частица е затворена във вакуола поради натискането на плазмената мембрана на фагоцита върху нея като цип;

6) сливане на фагозоми с лизозоми;

7) унищожаване и храносмилане;

8) освобождаване на продукти от разграждането от клетката.

Фагоцитозата често се предшества от процеса на опсонизация (от гръцки opsoniazo - за осигуряване на храна, за хранене) на обекта. Обектът е клетка, която носи чужда информация. Инициаторът на този процес е образуването на комплекс антиген-антитяло на клетъчната повърхност. Антителата, локализирани на повърхността на чужда клетка, стимулират активирането и свързването на протеини на комплементната система към тях. Полученият комплекс действа като активатор на останалите етапи на фагоцитоза.

По-подробно етапите на фагоцитоза са както следва:

1. Хемотаксис. Чуждите клетки (опсонизирани или неопсонизирани) изпращат в околната среда хемотаксични сигнали, в посока на които фагоцитът започва да се движи. По-рано от други клетки неутрофилите мигрират към фокуса на възпалението, по-късно - макрофагите.

2. Адхезия на фагоцитите към обекта. Причинява се от наличието на рецептори на повърхността на фагоцитите за молекули, присъстващи на повърхността на обекта (собствени или свързани с него) Актът на сцепление включва две фази: разпознаване на чужд (специфичен процес) и прикрепване, или самото сцепление (неспецифичен процес). Ако няма предварително специфично разпознаване на чужди клетки, адхезията на фагоцитната клетка към обекта на фагоцитозата настъпва изключително бавно..

3. Активиране на мембраната. На този етап обектът е подготвен за гмуркане. Има активиране на протеин киназа С, освобождаване на калциеви йони от вътреклетъчните запаси. Зол-гел преходите в системата на клетъчните колоиди и актин-миозиновите пренареждания са от голямо значение..

4. Потапяне. Обектът е обвит. В процеса на фагоцитоза плазмената мембрана на макрофага с помощта на изпъкналите гънки, образувани от него, улавя обекта на фагоцитоза и го обгръща.

5. Образуване на фагозома. Мембраната се затваря, потапянето на обекта с част от фагоцитната мембрана вътре в клетката. Получената малка вакуола се нарича фагозома..

6. Образуване на фаголизозома. Сливане на фагозоми с лизозоми, което води до оптимални условия за бактериолиза и разцепване на убитата клетка.

7. Убиване и разделяне. Във фагозомата уловената чужда клетка умира. За убиването макрофагът произвежда и секретира реактивни кислородни производни във фагозомата. Основните вещества, участващи в бактериолизата: водороден прекис, продукти на азотния метаболизъм, лизозим и др. Процесът на унищожаване на бактериалните клетки е завършен поради активността на протеази, нуклеази, липази и други ензими.

Разграждането на уловения и убит материал е последният етап от фагоцитозата. За това лизозомите, които съдържат повече от 25 различни ензима, включително голям брой хидролитични ензими, се комбинират с фагозомата, съдържаща обекта на фагоцитоза. Във фагозомата се активират всички тези ензими, така нареченият метаболитен взрив, в резултат на което фагоцитираният обект се усвоява.

8. Освобождаване на продуктите от разграждането.

Фагоцитозата може да бъде:

* завършено (убиването и храносмилането са успешни);

* непълна (за редица патогени фагоцитозата е необходима стъпка в техния жизнен цикъл, например при микобактерии и гонококи).

Изследването на показателите за фагоцитоза е важно при сложния анализ и диагностика на състояния на имунна недостатъчност: често повтарящи се гнойно-възпалителни процеси, дългосрочни зарастващи рани, склонност към следоперативни усложнения.

За да проучите фагоцитната функция, използвайте:

* изчисляване на абсолютния брой фагоцити (неутрофили и моноцити);

* оценка на интензивността на усвояване на микробите от фагоцити;

* определяне на способността на фагоцитните клетки да смилат уловените микроби.

Най-информативно за оценка на активността на фагоцитозата се счита фагоцитното число, броят на активните фагоцити и индексът на завършеност на фагоцитозата.

Най-често срещаният метод за количествено определяне и характеризиране на морфологичните дефекти на неутрофилите е левкограма и цитологични изследвания с помощта на светлинна и електронна микроскопия..

За определяне на хемотаксичната активност на неутрофилите се използва метод за изследване на миграцията на левкоцити с помощта на камера на Бойден. Методът се основава на разделянето на два реагиращи компонента чрез микропорест филтър в разтвор: неутрофили и хемотаксични агенти (например С5а), които се поставят в долната камера и създават градиент на концентрация. Поставените в горната камера неутрофили мигрират по градиента и се събират на долната повърхност на филтъра. След стандартна инкубация филтрите се отстраняват, оцветяват и броят на клетките се брои. Методът е доста прост и възпроизводим. Същият принцип лежи в основата на метода на клетъчна миграция под агарозен гел, който се използва за определяне на хемотаксичния индекс.

За фагоцитното число нормата е 5-10 микробни частици. Това е средният брой микроби, абсорбирани от един кръвен неутрофил. Характеризира абсорбционната способност на неутрофилите. Определя се чрез преброяване на броя на абсорбираните бактерии от една клетка след инкубация на клетките на пациента със стандартни препарати от St. aureus или Е. coli и оцветяване на получените цитонамазки. Модификация на този тест е метод за определяне на бактерицидна активност, при който измита клетъчна суспензия се инкубира с бактериална суспензия, след това сместа се нанася върху повърхността на кръвен агар и след определено време се отчита броят на отглежданите бактериални колонии. И двата метода изискват стандартизация за използване във всяка конкретна лаборатория и информация за антибиотичната терапия, което може да доведе до ненадеждни резултати или грешки в тяхната интерпретация..

Капацитетът на фагоцитната кръв е нормален - 12,5-25x109 на 1 литър кръв. Това е броят на микробите, които неутрофилите могат да абсорбират в 1 L кръв.

Фагоцитният индекс е нормален 65-95%. Това е относителният брой неутрофили (изразени като процент), участващи във фагоцитозата.

Броят на активните фагоцити е нормален - 1,6-5,0x109 в 1 литър кръв. Това е абсолютният брой фагоцитни неутрофили в 1 литър кръв.

Индексът на пълнота на фагоцитозата обикновено е повече от 1. Той отразява храносмилателната способност на фагоцитите.

Фагоцитната активност на неутрофилите обикновено се увеличава в началото на развитието на възпалителния процес. Намаляването му води до хронифициране на възпалителния процес и поддържане на автоимунния процес, тъй като това нарушава функцията на разрушаване и отстраняване на имунните комплекси от тялото.

Спонтанен тест с NBT (нитро син тетразолий) - обикновено при възрастни броят на NBT-положителните неутрофили е до 10%. Този тест позволява да се оцени състоянието на кислород-зависимия механизъм на бактерицидна активност на фагоцитите (гранулоцити) в кръвта in vitro. Характеризира състоянието и степента на активиране на вътреклетъчната антибактериална система NADPH-оксидаза. Феноменът на респираторна (или метаболитна) експлозия е свързан със значително увеличаване на кислорода, абсорбиран от левкоцитите по време на фагоцитоза, в резултат на което се образува супероксиден радикал (O3-) и водороден прекис. Всички тези съединения имат микробицидни свойства и тяхното идентифициране е важен етап при оценката на функционалната активност на фагоцитните клетки..

Показателите на NBT теста се увеличават в началния период на остри бактериални инфекции, докато при подострото и хронично протичане на инфекциозния процес те намаляват.

Намаляването на спонтанния тест с NBT е характерно за хронифицирането на възпалителния процес, вродени дефекти на фагоцитната система, имунодефицити, злокачествени новообразувания, тежки изгаряния, травма, недохранване, лечение с някои лекарства, излагане на йонизиращо лъчение.

Повишаване на спонтанния тест с NBT се отбелязва с антигенно дразнене поради остро бактериално възпаление, левкоцитоза, повишена антитяло-зависима цитотоксичност на фагоцитите, автоалергични заболявания, алергии.

Активиран NBT тест се използва за определяне на фагоцитната метаболитна (зависима от кислорода) активност на неутрофилите. Тестът включва инкубация на неутрофили с NBT in vitro и чрез образуването на неразтворими цветни зърна на формазан може да се прецени за намаляването на NBT от супероксидния радикал, образуван при активиране на фагоцитите. Липсата на утайка показва неспособността на популацията от фагоцитни клетки да се метаболизира.

Обикновено при възрастен броят на NBT-положителните неутрофили е 40-80%. Намаляването на параметрите на активирания NBT тест на неутрофили под 40% и моноцити под 87% показва липса на фагоцитоза.

Определяне на показателите за фагоцитоза:

Фагоцитната активност на неутрофилите обикновено се увеличава в началото на развитието на възпалителния процес. Намаляването му води до хронифициране на възпалителния процес и поддържане на автоимунния процес, тъй като функцията на унищожаване и отстраняване на циркулиращите имунни комплекси от тялото е нарушена..

Фагоцитно число: средният брой микроорганизми, абсорбирани от един кръвен неутрофил. Характеризира абсорбционната способност на неутрофилите. Обикновено това са 5-10 микробни части.

Процент на фагоцитозата - Процентът на неутрофилите, които участват във фагоцитозата. Нормално е 65 - 95%.

Увеличение на показателите се наблюдава при: антигенно дразнене в резултат на бактериално възпаление (продромален период, период на остра проява на инфекция) с нормална активност на фагоцитозата; левкоцитоза; алергични реакции; автоимунни заболявания; повишена антитела-зависима цитотоксичност и отговор на присаждане на донори.

Намаляване на показателите се наблюдава при: хронични възпалителни заболявания с бактериален и вирусен характер; вродени дефекти на фагоцитната система, синдром на Chédiak-Higashi, болест на Даун, SLE, колагенози, заболявания на имунните комплекси, дефицит на имуноглобулини, комплемент; лечение с цитостатици, имуносупресори, излагане на йонизиращо лъчение; вторични и първични имунодефицити; новообразувания; тежки изгаряния, травми, стрес; чревни и бъбречни синдроми на загуба на протеин; недохранване; недостатъчност на фагоцитозата; хронично възпаление.

Спонтанният тест с NBT (нитро син тетразолий) дава възможност да се оцени степента на антигенно дразнене на кръвни гранулоцити, които не са активирани in vitro. Той характеризира степента на активиране на вътреклетъчните антибактериални системи. Принципът на метода се основава на редукцията на разтворимия багрил нитроблуев тетразолий, абсорбиран от фагоцита в неразтворим диформазан под въздействието на супероксиданион, образуван в реакцията NADPH - оксидаза, която инициира процеса на фагоцитна стимулация. Към фагоцитите се добавя жълтото багрилно тетразолиево багрило; обикновено, когато се абсорбира, метаболитната активност на фагоцитите се увеличава, нитроблуевият тетразолий се възстановява, продуктите от тази реакция се оцветяват в синьо. Нарушаването на метаболизма на фагоцитите се съди по намаляване на интензивността на синьото оцветяване. Когато се открият нарушения, се определя нивото на цитохром b558 и други протеини на фагоцитите. Индикатори за NBT - тестово увеличение в началния период на остри бактериални инфекции, докато при хроничния ход на инфекциозния процес те намаляват. Санирането на тялото от патогени е придружено от нормализиране на показателя. Рязкото намаляване показва декомпенсация на противоинфекциозната защита и е прогностично неблагоприятен признак. Индикаторът за спонтанен NBT - тест обикновено е до 10%.

Увеличение на показателите се наблюдава, когато: антигенно дразнене в резултат на бактериално възпаление (продромален период, период на остра проява на инфекция) с нормална активност на фагоцитоза; хронична грануломатоза; левкоцитоза; алергични реакции; автоимунни заболявания; повишена антитела-зависима цитотоксичност.

Намаляване на показателите се наблюдава при: хронични възпалителни заболявания с бактериален и вирусен характер; вродени дефекти на фагоцитната система, синдром на Chédiak-Higashi, болест на Даун, SLE, колагенози, заболявания на имунните комплекси, дефицит на имуноглобулини, комплемент; лечение с цитостатици, имуносупресори, излагане на йонизиращо лъчение; вторични и първични имунодефицити, новообразувания, тежки изгаряния, травми, стрес; недостатъчност на фагоцитозата; хронично възпаление.

Индуциран NBT - тестът ви позволява да оцените функционалния резерв на кислород-зависимия механизъм на бактерицидна активност на фагоцитите. Тестът се използва за идентифициране на резервните възможности на вътреклетъчните фагоцитни системи. При запазена вътреклетъчна антибактериална активност във фагоцитите, броят на формазан-положителните неутрофили рязко се увеличава след стимулацията им с латекс. Намаляването на параметрите на стимулирания NBT - тест на неутрофилите е под 20%, а моноцитите под 30% показват липса на фагоцитоза. Стойността на стимулирания NBT - тест обикновено е 20 -40%.

Оценката на фагоцитната активност на левкоцитите е най-информативният начин за изследване на опсонините и функционалното състояние на фагоцитите.

1) Левкоцитите, изолирани от кръвта на пациента, се измиват от серума, преброяват се и се поставят в среда, съдържаща серума на здрав или болен човек (източник на опсонини) и живи бактерии (обикновено Staphylococcus aureus или Escherichia coli).

2) Сместа се инкубира при 37 ° С, като се вземат проби на 0, 30, 60 и 120 минути след началото на инкубацията. За да се определи броят на жизнеспособните бактерии, всяка проба бързо се охлажда и инокулира.

3) След 2 часа след началото на инкубацията, сместа се центрофугира. Левкоцитите и фагоцитираните бактерии се утаяват на дъното, докато не-гооцитираните бактерии остават в супернатантата. Определя се броят на жизнеспособните бактерии в утайката и супернатантата.

Оценка на резултатите Обикновено около 95% от бактериите се абсорбират и унищожават от фагоцитите в рамките на 2 часа. При хронична грануломатозна болест броят на унищожените бактерии не надвишава 10% и вътре в левкоцитите се намират жизнеспособни бактерии. Наличието на живи бактерии в левкоцитите по време на инкубация със серум на здрав човек показва нарушение на храносмилането на бактерии при липса на намаляване на способността за улавяне на бактерии. Повишеното съдържание на жизнеспособни бактерии в супернатантата по време на инкубацията със серума на пациента показва дефицит на опсонини.

Хемотаксис на левкоцитите Нарушаването на хемотаксиса може да бъде причинено от дефект във фагоцитите, наличието на инхибитори на хемотаксис, дефицит на серум или тъканни фактори.

Метод за прозорци на кожата С помощта на скалпел отстранете повърхностния слой на епидермиса с площ 4 mm2 (трябва да се появи малко количество кръв). Върху повреденото място се поставя покривно стъкло. През деня, на всеки 0,5-2 часа, покривното стъкло се сменя. След това очилата се оцветяват и левкоцитите върху тях се изследват под микроскоп. Обикновено през първите 2 часа се наблюдава приток на неутрофили към мястото на нараняване. През следващите 12 часа неутрофилите се заменят с моноцити.

Проучването на in vitro хемотаксис се основава на стимулиране на фагоцити, изолирани от кръвта от фактори на хемотаксис. Способността на фагоцитите за насочена миграция може да бъде оценена чрез поставянето им в камера на Бойден или агарозна чаша на Петри.

Адхезия на левкоцитите Нарушената адхезия на левкоцитите се причинява от намаляване на експресията или липсата на адхезионни молекули на тяхната повърхност, например CD11 / CD18. Поточната цитофлуорометрия се използва за определяне на адхезионните молекули. Липсата на CD11 / CD18 върху неутрофилите и моноцитите се проявява чрез късно отпадане на връвта, повтарящи се бактериални инфекции, пародонтоза. Адхезията на левкоцитите може да се оцени и по способността им да се придържат към ендотелните клетки..

Имунен статус, фагоцитоза (фагоцитен индекс, фагоцитен индекс, индекс на завършеност на фагоцитозата), кръв

Метод

От кръвта се получава левкоцитна суспензия по определен начин, който се смесва с точния брой левкоцити (1 милиард микроба в 1 ml). След 30 и 120 минути от тази смес се приготвят намазки и се оцветяват по Romanovsky-Giemsa. Около 200 клетки се изследват под микроскоп и се определя броят на фагоцитите, които са абсорбирали бактериите, интензивността на тяхното улавяне и унищожаване.

1. Фагоцитният индекс е процентът на фагоцитите, които са абсорбирали бактерии след 30 и 120 минути, към общия брой сканирани клетки.

2. Фагоцитен индикатор - средният брой бактерии във фагоцита след 30 и 120 минути (произвеждат математическо разделение на общия брой бактерии, абсорбирани от фагоцитите, чрез фагоцитния индекс)

3. Индекс на пълнота на фагоцитозата - изчислява се чрез разделяне на броя на убитите бактерии във фагоцитите на общия брой абсорбирани бактерии и умножаване по 100.

Референтни стойности - норма
(Имунен статус, фагоцитоза (фагоцитен индекс, фагоцитен индекс, индекс на завършеност на фагоцитозата), кръв)

Информацията относно референтните стойности на показателите, както и състава на показателите, включени в анализа, може да се различава леко в зависимост от лабораторията.!

Нормални показатели за фагоцитна активност:

1. Фагоцитен индекс: след 30 минути - 94,2 ± 1,5, след 120 минути - 92,0 ± 2,5

2. Фагоцитен индекс: след 30 минути - 11,3 ± 1,0, след 120 минути - 9,8 ± 1,0

3. Индекс на пълнота на фагоцитозата: 66,3 ± 2,6

Показания

1. Тежки, продължителни инфекции

2. Прояви на всякакъв имунодефицит

3. Соматични заболявания - чернодробна цироза, гломерулонефрит - с прояви на имунодефицит

Нарастващи стойности (положителен резултат)

1. С бактериални възпалителни процеси (в норма)

2. Повишено съдържание на левкоцити в кръвта (левкоцитоза)

3. Алергични реакции, автоалергични заболявания

Намаляващи стойности (отрицателен резултат)

Намаляването на показателите за активност на фагоцитозата показва различни нарушения в системата на неспецифичния клетъчен имунитет. Това може да се дължи на намалено производство на фагоцити, бързото им разпадане, нарушена подвижност, нарушено усвояване на чуждо вещество, нарушени процеси на неговото разрушаване и др. Всичко това показва намаляване на устойчивостта на организма към инфекция.

Най-често фагоцитната активност намалява с:

1. На фона на тежки инфекции, интоксикация, йонизиращо лъчение (вторичен имунодефицит)

2. Системни автоимунни заболявания на съединителната тъкан (системен лупус еритематозус, ревматоиден артрит)

3. Първични имунодефицити (синдром на Chédiak-Higashi, хронична грануломатозна болест)

4. Хроничен активен хепатит, чернодробна цироза

Измерване на фагоцитоза

Фагоцитозата е един от жизненоважните механизми на нашия имунитет. Ако не беше полимикробната фагоцитоза, ние бихме били на практика беззащитни срещу безбройните бактерии, гъбички, вируси и паразити, които ни атакуват всеки ден. Между другото, за един ден имаме реален риск от заразяване с някакво инфекциозно или паразитно заболяване няколкостотин пъти и само имунната система ни предпазва от това.

Фагоцитозата е важна връзка в защитата на здравето. Но е известно, че може да продължи с различна степен на ефективност. От какво зависи и как можете да определите показателите на фагоцитозата, отразяващи нейното "качество"?

Фагоцитоза при различни инфекции:

Всъщност първото нещо, което определя силата на защитата, е самият микроб, който „атакува“ тялото. Някои микроорганизми имат специални свойства. Поради тези свойства клетките, които участват във фагоцитозата, не могат да ги унищожат..

Например, причинителите на токсоплазмоза и туберкулоза се абсорбират от фагоцитите, но в същото време те продължават да се развиват вътре в тях, без да навредят на себе си. Това се постига, защото те инхибират фагоцитозата: мембраната на микробите освобождава вещества, които не позволяват на фагоцита да действа върху тях с ензимите на своите лизозоми..

Някои стрептококи, стафилококи и гонококи също могат да живеят щастливо и дори да се размножават във фагоцитите. Тези микроби произвеждат съединения, които детоксикират гореспоменатите ензими..

Хламидиите и рикетсията не само се установяват във фагоцита, но и установяват свои собствени порядки там. И така, те разтварят „торбичката“, в която фагоцитът ги „улавя“, и преминават в цитоплазмата на клетката. Там те съществуват, използвайки ресурсите на фагоцита за своето хранене..

И накрая, вирусите обикновено са трудно достъпни за фагоцитоза: много от тях веднага проникват в клетъчното ядро, интегрират се в неговия геном и започват да контролират работата му, неуязвими за имунната защита и следователно много опасни за здравето.

По този начин за възможността за неефективна фагоцитоза може да се съди по това от какво точно е болен човек..

Хламидия

Анализи, които определят качеството на фагоцитозата:

Фагоцитозата включва предимно два вида клетки: неутрофили и макрофаги. Следователно, за да разберат колко добре протича фагоцитозата в човешкото тяло, лекарите изучават параметрите предимно на тези клетки. По-долу е даден списък с тестове, за да се установи доколко активният пациент има полимикробна фагоцитоза.

1. Пълна кръвна картина с определяне на броя на неутрофилите.

2. Определяне на фагоцитния брой или фагоцитната активност. За това неутрофилите се отстраняват от кръвна проба и се наблюдават, докато извършват процеса на фагоцитоза. Като "жертви" им се предлагат стафилококи, парчета латекс, гъбички Candida. Броят на профагоцитните неутрофили се разделя на общия им брой и се получава желаният показател за фагоцитоза.

3. Изчисляване на фагоцитния индекс. Както знаете, всеки фагоцит може да унищожи няколко вредни обекта през целия си живот. При изчисляване на фагоцитния индекс лабораторните асистенти преброяват колко бактерии са били уловени от един фагоцит. Според „лакомията“ на фагоцитите се прави заключение за това колко добре се извършва защитата на тялото.

4. Определяне на опсонофагоцитния индекс. Опсонините са вещества, които усилват фагоцитозата: мембраната на фагоцитите реагира по-добре на присъствието на вредни частици в организма и процесът на тяхното усвояване е по-активен, ако в кръвта има много опсонини. Опсонофагоцитният индекс се определя от съотношението на фагоцитния индекс на серума на пациента и същия индекс на нормалния серум. Колкото по-висок е индексът, толкова по-добра е фагоцитозата.

5. Определянето на скоростта на движение на фагоцитите към вредните частици, попаднали в тялото, се извършва чрез специална реакция на инхибиране на миграцията на левкоцитите.

Има и други тестове за определяне на потенциала за фагоцитоза. Няма да отегчаваме читателите с подробности, ще кажем само, че получаването на информация за качеството на фагоцитозата е възможно и за това трябва да се свържете с имунолог, който да ви каже какви конкретни изследвания трябва да се направят.

Ако има основание да смятате, че имате слаб имунитет или ако знаете със сигурност за това от резултатите от проведените тестове, трябва да започнете да приемате лекарства, които ще имат благоприятен ефект върху ефективността на фагоцитозата. Най-добрият от тях днес е Transfer Factor, имуномодулатор. Неговият образователен ефект върху имунитета, който се реализира поради наличието на информационни молекули в инструмента, позволява да се нормализират всички процеси, протичащи в имунната система. Приемането на Transfer Factor е необходима мярка за подобряване на качеството на всички връзки на имунната система, което означава, че е гаранция за поддържане и укрепване на здравето като цяло..

Фагоцитна активност на левкоцитите

Информация за проучване

Фагоцитната активност на левкоцитите е определянето на съдържанието на неутрофили и моноцити, способни да се свързват на тяхната повърхност, абсорбирайки и смилайки микробна тестова култура (маркирани бактерии).

Показания за назначаване на лабораторни изследвания:

  • Чести повтарящи се инфекциозни заболявания,
  • повтарящи се гнойни възпалителни процеси,
  • дългосрочни незарастващи рани,
  • чести следоперативни усложнения,
  • съмнение за автоимунно заболяване,
  • динамично наблюдение на такива пациенти, оценка на активността и ефективността на терапията за колагенови заболявания и ревматични заболявания.

Причините за увеличаване на фагоцитната активност на левкоцитите:

  • остри бактериални инфекции.

Причините за намаляването на фагоцитната активност на левкоцитите:

  • вродени имунодефицити
  • хронични инфекции
  • автоимунни заболявания
  • алергични заболявания
  • вирусни инфекции
  • синдром на придобита имунна недостатъчност

Не се изисква специална подготовка за изследването. Необходимо е да се спазват общите правила за подготовка за изследване.

ОБЩИ ПРАВИЛА ЗА ПОДГОТОВКА ЗА ИЗСЛЕДВАНЕ:

1. За повечето изследвания се препоръчва да давате кръв сутрин, от 8 до 11 часа, на гладно (трябва да минат поне 8 часа между последното хранене и вземането на кръв, можете да пиете вода както обикновено), в навечерието на проучването, лека вечеря с ограничение ядене на мазни храни. За тестове за инфекция и спешни изследвания е допустимо да давате кръв 4-6 часа след последното хранене.

2. ВНИМАНИЕ! Специални правила за подготовка за редица тестове: стриктно на празен стомах, след 12-14 часа на гладно, трябва да бъде дарена кръв за гастрин-17, липиден профил (общ холестерол, HDL холестерол, LDL холестерол, VLDL холестерол, триглицериди, липопротеин (а), аполипопротеин А1, аполипопротеин В); тест за глюкозен толеранс се извършва сутрин на гладно след 12-16 часа на гладно.

3. В навечерието на проучването (в рамките на 24 часа) изключете алкохола, интензивната физическа активност, приемането на лекарства (в съгласие с лекаря).

4. В продължение на 1-2 часа преди даряването на кръв, въздържайте се от пушене, не пийте сок, чай, кафе, можете да пиете негазирана вода. Премахнете физическия стрес (бягане, бързо изкачване на стълби), емоционално вълнение. Препоръчително е да си починете и да се успокоите 15 минути преди да дарите кръв.

5. Не дарявайте кръв за лабораторни изследвания веднага след физиотерапевтични процедури, инструментален преглед, рентгенови и ултразвукови изследвания, масаж и други медицински процедури.

6. При проследяване на лабораторните параметри в динамика се препоръчва провеждането на многократни изследвания при едни и същи условия - в същата лаборатория, даряване на кръв по едно и също време на деня и т.н..

7. Кръв за изследване трябва да бъде дарена преди приема на лекарства или не по-рано от 10-14 дни след оттеглянето на лекарството. За да се оцени контролът на ефективността на лечението с каквито и да било лекарства, трябва да се проведе проучване 7-14 дни след последния прием на лекарството.

Ако приемате лекарства, уведомете Вашия лекар за това..


Следваща Статия
Съвместимост на кръвни групи и Rh фактор